實(shí)驗(yàn)操作步驟：
a．采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動(dòng)物。
b．立即在無(wú)菌超凈臺(tái)內(nèi)用70％乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。
c．用無(wú)菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無(wú)菌鑷子將皮膚扯向后腿。
d．用另一無(wú)菌的剪刀和鑷子切開(kāi)腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無(wú)菌的培養(yǎng)皿上。
e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無(wú)菌的含有無(wú)菌PBS的100ml燒杯中。
f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 | 貨號(hào) |
子宮頸癌細(xì)胞：C-33 A | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細(xì)胞系 | GOY-01X0045 |
產(chǎn)品介紹：
名稱 子宮頸癌細(xì)胞：C-33 A
別稱C33A; C33a; C33-A; C-33-A; C-33A; C33
種屬人類
年齡（性別）女性，66歲
組織來(lái)源宮頸癌
生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣
背景描述C-33 A細(xì)胞是由N·Auersperg從宮頸癌切片中建立的一系列細(xì)胞株中的一株。C-33 A細(xì)胞一開(kāi)始就表現(xiàn)出亞二倍體核型及上皮細(xì)胞形態(tài)，C-33 A細(xì)胞經(jīng)連續(xù)傳代可以觀察到核型不穩(wěn)定。C-33 A細(xì)胞存在成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤蛋白(pRB)，但大小不正常；C-33 A細(xì)胞p53表達(dá)上調(diào)，且有一個(gè)273位密碼子的點(diǎn)突變導(dǎo)致Arg→Cys的替換。
生物安全等級(jí)1
生長(zhǎng)培養(yǎng)基MEM＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例1:3-1:4
推薦換液頻率2~3次/周
倍增時(shí)間~32-48小時(shí)
凍存條件
凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
處理方法：
收到細(xì)胞后，檢查外包裝是否完整，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問(wèn)題，請(qǐng)即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作：
1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。
2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。
4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。
5. ①若細(xì)胞密度較小，無(wú)菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上，進(jìn)行傳代。
注意事項(xiàng)：
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，取得最佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，
避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗
并*清除殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
大鼠 TAGLN2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 SUCLA2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 TMEM150A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 UFD1L 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 PRL2A1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 ZFP90 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 SPARC 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 CTSJ 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 UBOX5 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 SLC11A2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
子宮頸癌細(xì)胞：C-33 A phospho-P53(Ser376) 磷酸化瘤抑制基因P53抗體 規(guī)格: 0.1ml
COL20A1 膠原樣蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
2 ug pRRLSIN.cPPT.PGK-GFP.WPRE pRRLSIN.cPPT.PGK-GFP.WPRE 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基 250g
25g DEAE葡聚糖凝膠 A-25 DEAE-Sephadex A-25 -20℃保存
500mL HEPES Buffered Saline,5X,pH7.0 HEPES Buffered Saline,5X,pH7.0 常溫保存
1mL 鋒溶液,100mg/mL Cephalotin Solution 4℃避光保存
1瓶 Daudi細(xì)胞株 Daudi 低溫運(yùn)輸和保存
堿性蛋白胨水管（10ml） Alkaline peptone water 10ml*20
5ug Oligo dT12-18引物 Oligo dT12-18 Primer -20℃保存
2 ug pCMV-SPORT6 PPP2R3B pCMV-SPORT6 PPP2R3B 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
ICAM4/CD242 細(xì)胞間粘附分子4抗體 規(guī)格: 0.2ml
