植物乳球菌

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菌種的培養(yǎng)：

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經過擴大培養(yǎng)成為具有一定數量和質量的純生產菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產菌種不產孢子，如赤霉素產生菌或產孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產酸菌種，則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時間更長，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多，有些可添加保護劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內，再放入低溫冰箱內進行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內，再置于冰箱內進行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍*的微生物保存法。

Rhizobium galegae趨化因子C-C-基元配體4檢測試劑盒

Rhizobium galegae腎檢測試劑盒

Rhizobium galegae抗原215檢測試劑盒

Rhizobium galegae亮氨肽3檢測試劑盒

Rhizobium galegae可溶性CD44分子檢測試劑盒

Rhizobium galegae趨化因子配體2檢測試劑盒

Rhizobium galegae嗜酸性粒主要堿性蛋白檢測試劑盒

Rhizobium galegae細小病B19-IgG抗體檢測試劑盒

植物乳球菌2,5-二溴 98%豚鼠白介素13(IL-13)免疫試劑盒色素CYP3A抗體Rex1/Zinc finger protein 754  鋅指蛋白754抗體

N-二硫代亞碳二酯 90%豚鼠白介素12(IL-12/P70)免疫試劑盒色素cP450 CYP20A1抗體Retinoic acid induced 17  維誘導蛋白17抗體

L-(-)-二(對酰) 97%豚鼠白介素10(IL-10)免疫試劑盒色素cP4501B1抗體Ret/HSCR1  原癌因酪氨蛋白激受體RET/多發(fā)性內分泌腺瘤和狀腺髓樣癌蛋白抗體

3-(二氨)烯乙酯 98%豚鼠白介素1(IL-1)免疫試劑盒色素cP450 CYP26A1抗體RET/C ret  指狀蛋白RET抗體

3-氨巴豆乙酯 99%豚鼠白蛋白免疫試劑盒化周期素E抗體Resistin  抵抗素抗體

硫代草氨乙酯 95%豚鼠γ干擾素(IFN-γ)免疫試劑盒化周期素E2抗體Resistin  抵抗素抗體

乙乙酯 98%豚鼠α干擾素(IFN-α)免疫試劑盒周期素M3抗體RERG  Ras相關雌激素調節(jié)生長抑制蛋白

二乙酯 97%豚鼠P物質(SP)免疫試劑盒周期素Y/X抗體RERE  肌相關蛋白1抗體

3-(5-乙-1,2,4-噁二唑-3-) 97%豚鼠Ⅱ型肺泡表面抗原(KL-6)免疫試劑盒化周期素D3抗體Reprimo  質內的糖化蛋白抗體

4-(5-乙-1,2,4-噁二唑-3-) 97%豚鼠25羥3(25 HVD3)免疫試劑盒色素b5還原3抗體Repetin  中間絲相關蛋白抗體

硫代乙乙酯 98%兔ELSIA試劑盒CWC22蛋白抗體RENT1/hUPF1  ATP依賴解旋RENT1抗體

3-氟-4-酚 99%兔組織因子途徑抑制物(TFPI)免疫試劑盒9號染色體開放閱讀框95抗體Renin  腎素/血管緊張素形成Ren1抗體

對氟乙酯 99%兔子組織因子(TF)免疫試劑盒19號染色體開放閱讀框67抗體RENBP  腎素結合蛋白抗體

3-氟芐 97%兔子組織型纖溶原激活劑(t-PA)免疫試劑盒化酪蛋白激1γ1+γ2+γ3抗體Renalase  腎抗體

8-氟-4-羥-2-三氟喹啉 97%兔子組織多肽抗原(TPA)免疫試劑盒原卟啉氧化3抗體REM/GTP binding protein REM1  GTP結合蛋白REM1抗體

微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產孢子的營養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數為28 ℃，少數為37 ℃，培養(yǎng)時間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備　

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養(yǎng)基。這是由于這些農產品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備　

搖瓶種子進罐，常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng)，有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備　

種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級種子，把一級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵，稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內，經過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級種子，將二級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵，稱為三級發(fā)酵。同樣道理，使用三級種子的發(fā)酵，稱為四級發(fā)酵。