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    • 細胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(BAI)微量法

    細胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(BAI)微量法

    參考價
    面議
    具體成交價以合同協(xié)議為準
    • 型號
    • 品牌其他品牌
    • 所在地上海市
    • 更新時間2022-04-27
    • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
    • 入駐年限10
    • 實名認證已認證
    • 產(chǎn)品數(shù)量10000
    • 人氣值318376
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    上海谷研實業(yè)有限公司主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的銷售,主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產(chǎn)品。銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司產(chǎn)品。    


    公司客戶遍布大學、研究所、醫(yī)院、衛(wèi)生、商品檢驗檢疫、制藥公司、生物技術公司和食品工業(yè)等單位。


    公司主推品牌: (進口、國產(chǎn)) Amresco 、Sigma、 Peprotech 、Corning 、BD Faclon 、Axygen、 Invitrogen、 Qiagen、 Hyclone 、Uscnlife、 Wako 、SantaCruz、sciencell、Gibco、R&D、Linco、Amersham、Millipore。





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    貨號GOY-01S6713
    細胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(BAI)微量法公司正在出售的產(chǎn)品:甲;純品型;標準品;有證書 規(guī)格: 0.25g 訂購|咨詢
    E;純品型;標準品(α-); 21590 規(guī)格: 0.5g 訂購|咨詢
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    細胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(BAI)微量法 產(chǎn)品詳情

    【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!

    產(chǎn)品名稱

    規(guī)格

    檢測方法

    貨號

    細胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(BAI)微量法

    100管/48樣

    微量法

    GOY-01S6713

    商品介紹

    測定意義

    蔗糖轉(zhuǎn)化酶(InvertaseIvr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代謝關鍵酶之一。根據(jù)最適 pHIvr分為酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)和中性轉(zhuǎn)化酶(NI)兩種類型。                          

    AI的最適pH35AI分為可溶性AI(S-AI)和細胞壁不溶性AIB-AI)兩種類型。B-AI存在于細胞間隙并結合在細胞壁上,主要參與韌皮部質(zhì)外體卸載時蔗糖的分解,以維持庫源之間蔗糖的濃度。

    測定原理:

    B-AI催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖,進一步與3,5-二硝基水楊酸反應,生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內(nèi)510nm光吸收增加速率與B-AI活性成正比。

    自備用品:

    可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、

    試劑的組成和配制:

    提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

    試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

    試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

    試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

    試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
    QQ截圖20220307153443.png

    所需的儀器和用品:

    可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

    四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

    建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

    樣本和試劑浪費!

    1、樣本制備

    ① 組織樣本:

    取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

    勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

    【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取

    ② 細菌/細胞樣本:

    先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

    提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

    12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

    【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10

    4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

    注意事項:

    1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

    2、對照管只需要做一管。

    3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。

    4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;

    2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數(shù)。

    若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般

    將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通常可以使測定正常。

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    測定步驟:

    1、 酶標儀預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。

    2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

    3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

    4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。

    5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)

    選擇抗凝的注意點:

    ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

    ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

    ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

    ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。


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