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    果膠甲酯化程度測(cè)試盒可見分光光度法

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    • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
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    貨號(hào)BJ-01611399-2
    果膠甲酯化程度測(cè)試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:GATM蛋白抗體Phospho-Lyn (Tyr396) /FITC 熒光su標(biāo)記磷化膜相關(guān)蛋白酪氨激Lyn抗體IgG
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    果膠甲酯化程度測(cè)試盒可見分光光度法 產(chǎn)品詳情

    特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

    產(chǎn)品名稱

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    規(guī)格

    貨號(hào)

    果膠甲酯化程度測(cè)試盒可見分光光度法

    可見分光光度法

    50管/48樣

    BJ-01611399-2

    商品介紹:

    測(cè)定意義

    植物細(xì)胞壁中的果膠是植物初生細(xì)胞壁的主要成分,除了起結(jié)構(gòu)支撐、物質(zhì)運(yùn)輸?shù)茸饔猛猓€具有抵抗逆境的作用。果膠甲酯化程度影響了細(xì)胞壁的堅(jiān)韌程度及其抗性。

    測(cè)定原理

    果膠甲酯鍵經(jīng)皂化處理后釋放出甲醇,甲醇與2,4-戊二酮反應(yīng)顯色,在412nm下測(cè)定吸光值;同時(shí)半乳糖醛酸在70℃下與濃硫酸反應(yīng)生成5-甲酰基-2-呋喃甲酸,5-甲酰基-2-呋喃甲酸與3,5-二甲jiben酚反應(yīng)產(chǎn)生有色物質(zhì),在450nm下有最大吸光值。以甲醇生成量與半乳糖醛酸含量的比值代表果膠甲酯化程度。

    自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

    天平、低溫離心機(jī)、分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋、蒸餾水、硫酸。

    優(yōu)點(diǎn)如下:

    1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。

    2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。

    3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。

    4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。

    5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。

    6、回收試驗(yàn): X =103.3%。

    7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。

    8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。

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    測(cè)定步驟:

    1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。

    2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

    3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

    4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。

    5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。

    注意事項(xiàng):

    待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。

    一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。

    標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無(wú)需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。

    抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來(lái)的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒(méi)有顏色,如果設(shè)置了使用說(shuō)明中的空白對(duì)照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。

    suan化Ras信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白抗體黃赭色鏈霉菌地瓜藤

    氯酮抗體大腸桿菌

    7抗體橢圓釀酒酵母

    9抗體(舒血管su9)空泡鹽紅菌血小板源性生長(zhǎng)因子-A抗體流式免疫組化

    14抗體黑曲霉CBZ-L-焦谷ansuan

    電壓閥門通道混合器相關(guān)亞家族成員7抗體大腸埃希菌Na-對(duì)甲苯磺酰-L-苯丙ansuan氯甲基酮

    ATP敏感性通道亞基kir6.2抗體側(cè)孢短芽胞桿菌肌酐

    TIP60抗體淡紫擬青霉D-天冬ansuan二甲酯鹽suan鹽

    組蛋白賴ansuan特異性脫甲基酶1抗體小平菇(秀珍菇)膠原酶

    轉(zhuǎn)錄因子GATA3結(jié)合蛋白G3B抗體根瘤菌核糖核suan酶T1

    suan化周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗體豌豆根瘤菌人纖溶酶

    suan化通道蛋白DRK1抗體大腸桿菌2′-脫氧胞苷-5′-二磷suan三鈉鹽

    離子通道蛋白Kv3.4抗體吸水鏈霉菌花寶2號(hào)

    離子通道蛋白Kv3.3抗體熱帶假絲酵母瓊脂糖

    組蛋白去甲基化酶JMJD2B抗體頂孢霉微晶纖維su板
    果膠甲酯化程度測(cè)試盒可見分光光度法白介su10(IL-10)試劑盒Anti-CPN1 Antibody白介su12抗原(人)

    血清樣蛋白A(SAA)試劑盒Anti-CPA5 Antibody白介su-12受體β2抗原

    suan化腺苷suan活化蛋白激酶(AMPK)試劑盒Anti-CPNE8 Antibody白介su13抗原

    γ干擾su(IFN-γ)試劑盒Anti-CPNE8 Antibody白介su14抗原

    白介su2(IL-2)試劑盒Anti-CR2 Antibody白介su-15抗原

    白介su1β(IL-1β)試劑盒Anti-CPN2 Antibody白介su16抗原

    半胱ansuan蛋白mei抑制劑(CSTA)試劑盒 Anti-CR1 Antibody白介su-16抗原   

    實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

    一、肝素的配制:

    市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

    肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

    二、血液樣本的收集:

    全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

    1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

    2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。

    選擇抗凝的注意點(diǎn):

    ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

    ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

    ③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

    ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后


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