膜輔蛋白抗體

抗體制備過程：
1.材料與試劑
  a．提取的動物 Ig
  b．弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
  c．青霉素和鏈霉素
  d．實驗動物 兔
  e．其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，殺死實驗活體，采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清（無菌采制）

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單抗的制備過程：
1.動物免疫：注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細(xì)胞：與培養(yǎng)好的骨髓瘤細(xì)胞混合，人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合。
3.細(xì)胞融合：淋巴細(xì)胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細(xì)胞的篩選：HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。（含次黃嘌呤（H）、氨基喋呤（A）及胸腺嘧啶核苷（T）的一種培養(yǎng)基，其中三種成分與細(xì)胞DNA合成有關(guān)，骨髓瘤細(xì)胞遺傳缺陷型，不能利用，被淘汰）
5.培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞：體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞，從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體。或者，將雜交瘤細(xì)胞移植到小鼠腹腔內(nèi)，從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化
圖
實驗原理 :
（1）特異性結(jié)合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞，通常需要補體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合，直接發(fā)揮中和病毒的作用。
（2）活補體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
（3）結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，參與免疫應(yīng)答。
（4）產(chǎn)品僅用于科研可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
（5）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
（6）抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
單克隆抗體：
1.概念：由單個B淋巴細(xì)胞進行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體。
2.特點：化學(xué)性質(zhì)單一，特異性強，靈敏度高。
3.單克隆抗體的應(yīng)用：
（1）診斷疾病：診斷病毒引起的疾病和用癌細(xì)胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
（2）藥物導(dǎo)向治療：運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
（3）分離和純化抗原分子。
麥康凱瓊脂平衡鹽溶液破骨細(xì)胞BCHE(butyrylcholinesterase)CT  丁酰膽堿脂酶抗原(C端)

堿性瓊脂平板多聚賴氨酸 1 mg/ml皮膚肥大細(xì)胞Nurr1  核受體相關(guān)因子-1（抗原）

堿性膽鹽瓊脂多聚賴氨酸10 mg/ml成骨細(xì)胞NT5C2  胞漿-5´-核苷酸酶-Ⅱ

哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ)胎牛血清腦動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞BECN1(Beclin1)  一種抑癌基因（多肽）

哥倫比亞瓊脂青霉素/鏈霉素溶液腦動脈血管平滑肌細(xì)胞OGP (Ostegenic Growth Peptide)  成骨生長肽 (骨生長激素肽)(蛋白多肽)

豆粉瓊脂青霉素/鏈霉素溶液腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞OPN  骨橋蛋白（多肽抗原）

CLED培養(yǎng)基抗真菌溶液腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞BAFF/CD257(B cell activating factor)  TNF家族B細(xì)胞激活因子抗原

大腸桿菌顯色培養(yǎng)基（ECA）抗霉菌溶液腦膜細(xì)胞P53  腫瘤抑制基因（抗原）

Phospho-HDAC4(Ser246)/HDAC5(Ser259)/HDAC7(Ser155)/FITC   熒光素標(biāo)記磷酸化組蛋白去乙酰化酶4、5、7IgG22號染色體開放閱讀框153,4-二氟苯甲Rat RPL26 (Ribosomal Protein L26) 檢測試劑盒

Phospho-HDAC4(Ser632)/HDAC5(Ser498)/HDAC7(Ser486) /FITC   熒光素標(biāo)記磷酸化組蛋白去乙酰化酶4、5、7IgG22號染色體開放閱讀框135-甲基異噁唑-3-羧酸Rat RNF4 (Ring Finger Protein 4) 檢測試劑盒

HDAC5/FITC  熒光素標(biāo)記組蛋白去乙酰化酶5IgG22號染色體開放閱讀框265-甲基異噁唑-3-羧酸Rat TACE (TNF α Converting Enzyme) 檢測試劑盒

HDAC6/FITC  熒光素標(biāo)記組蛋白去乙酰化酶6IgG補體C2b鏈多肽5-甲基異噁唑-3-羧酸Rat RUNX2 (Runt Related Transcription Factor 2) 檢測試劑盒

phospho-HDAC6 (Ser22) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化組蛋白去乙酰化酶6IgG2號染色體開放閱讀框16Cbz-L-脯氨酸酰胺Rat S100A11 (S100 Calcium Binding Protein A11) 檢測試劑盒

HDAC7/FITC  熒光素標(biāo)記組蛋白去乙酰化酶7IgG2號染色體開放閱讀框27Cbz-L-脯氨酸酰胺Rat S100B (S100 Calcium Binding Protein B) 檢測試劑盒

phospho-HDAC7 (Ser318)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化組蛋白去乙酰化酶7IgG磷酸化δ連環(huán)蛋白蘋果酸蘇尼替尼Rat S100A6 (S100 Calcium-Binding Protein A6) 檢測試劑盒

HDAC8 /FITC  熒光素標(biāo)記組蛋白去乙酰化酶8IgG磷酸化δ連環(huán)蛋白蘋果酸蘇尼替尼Rat FABP3 (Fatty Acid Binding Protein 3, Muscle and Heart) 檢測試劑盒
膜輔蛋白抗體釀酒酵母Mouse PCX (Podocalyxin)  Kit  

發(fā)酵畢赤酵母Mouse PVRL1 (Poliovirus Receptor Rated Protein 1)  Kit  

海生紅球Mouse PVRL2 (Poliovirus Receptor Rated Protein 2)  Kit  

pGEX-5X-3Mouse PVRL3 (Poliovirus Receptor Rated Protein 3)  Kit   

貝倫格葡萄座腔梨生專化型Mouse PC4 (activated RNA polymerase II transcription cofactor 4 )  Kit  

Enterobacter ludwigii HoffmannMouse PA (Prealbumin)  Kit

黃曲霉Mouse PAPP-A (pregnancy associated plasma protein A)  Kit

婁徹鏈霉Mouse Pro-ANP (Pro Atrial Natriuretic Peptide)  Kit
多克隆抗體定制：
當(dāng)機體受到抗原刺激后, 產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng)，由機體的漿細(xì)胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白，這就是免疫球蛋白，這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動物所產(chǎn)生的抗血清實際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)等優(yōu)點，產(chǎn)品僅用于科研被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)診斷領(lǐng)域,。
（1）IgG ：血清中含量，因此是重要的抗感染分子，包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補體，結(jié)合并增強巨噬細(xì)胞的吞噬功能（調(diào)理作用和 ADCC 效應(yīng)），穿過胎盤，保護胎兒及新生嬰兒免受感染。
（2）IgA ：分單體和雙體兩種。前者存在血清中，后者存在于黏膜表面及分泌液中，是黏膜局部抗感染的重要因素。
（3）IgM ：是分子量大，體內(nèi)受感染后早產(chǎn)生的抗體，具有很強的激活補體和調(diào)理作用，因此是重要的抗感染因子，且常用于診斷早期感染。
（4）IgD ：主要存在于成熟 B 細(xì)胞表面，是 B 細(xì)胞識別抗原的受體。
（5）IgE ：血清中含量少的抗體，某些過敏性體質(zhì)的人血清中可檢測到，參與介導(dǎo) I 型超敏反應(yīng)和抗寄生蟲感染。